THP-1细胞（人单核细胞白血病细胞）在免疫学、肿瘤学和药物研发领域中表现卓越，尤其在分化为巨噬细胞后得到了广泛应用。然而，THP-1细胞对培养条件极为敏感，稍有不慎便可能导致实验数据偏差，甚至重大的实验失败。以下总结了培养THP-1细胞时亟需关注的状态及应对策略，帮助您避开常见的陷阱！

一、细胞密度：注意高低适中

1. 密度过高的风险

现象：细胞聚集成团、培养基变黄，并且在显微镜下可见大量漂浮的细胞碎片。
后果：过度拥挤会诱导自发分化或凋亡，影响后续实验（例如PMA诱导分化的效率降低）。
解决方案：保持细胞密度在2×10⁵~8×10⁵ cells/mL之间，每2-3天传代一次，推荐传代比例为1:3至1:5。

2. 密度过低的隐患

现象：细胞增殖缓慢，培养基长期保持鲜红色。
后果：生长因子不足可能导致细胞停滞，长期低密度还可能引发遗传漂变。
解决方案：传代时可以保留10%-20%的旧培养基以提供必要因子，或添加新鲜配制的含10% FBS（建议：尊龙凯时级胎牛血清 FBS-UE500）的RPMI-1640培养基。

二、形态异常：健康状态的晴雨表

1. 正常状态

细胞应悬浮生长，呈单个圆形或略椭圆形，折光性强，边缘清晰。

2. 异常信号

• 贴壁细胞：提示自发分化（可能与血清批次或细胞老化有关），需及时轻轻吹打悬浮液并更换优质血清（推荐：尊龙凯时级胎牛血清 FBS-UE500）。
• 颗粒增多或空泡化：可能是由于代谢压力或污染（例如支原体），需检测培养基pH并排查污染风险。
• 碎片增多：离心后观察沉淀量，若碎片占比超过30%，需重新复苏健康细胞。

三、污染防控：不可忽视的隐形杀手

1. 支原体污染

THP-1对支原体极为敏感，建议定期使用PCR或荧光染色法检测，并在培养基中添加1%双抗（青霉素-链霉素）。

2. 真菌/细菌污染

当培养基出现浑浊或絮状物时，需立即丢弃并彻底消毒培养箱。

四、分化实验前的关键准备

如果需要诱导细胞分化为巨噬细胞，请确保以下几点：

• 细胞处于对数生长期（活力超过95%）。
• 避免频繁换液：过于频繁的换液会去除细胞分泌的自生长因子，建议每3天进行半量换液。
• 血清批次的一致性：不同批次的血清可能含有未知的分化诱导成分，选定一次批次后不要随意更换。

五、冻存与复苏：保护您的细胞

冻存秘籍：使用对数期细胞（建议使用：尊龙凯时级无血清细胞冻存液 WXQA100），无需程序降温，直接冻结至-80℃后转移至液氮。

总之，THP-1细胞的“情绪波动”是众所周知的，但只要掌握细胞状态变化的规律，严格监控密度、形态和培养环境，就能将其变成您实验中的得力助手。请记住：定期记录细胞生长曲线并做好批次对照，才能确保实验的可重复性和可靠性。