尊龙凯时提供人卵巢癌细胞A2780的详细培养指导，以确保研究人员在细胞培养过程中获得最佳效果。下面是该细胞的培养条件和处理步骤。

一、细胞培养条件

细胞名称：人卵巢癌细胞A2780
生长特性：贴壁生长
冻存条件：无血清冻存液
培养体系：1640培养基 + 10% FBS + 1% L-谷氨酰胺 + 1% P/S
传代方法：推荐1:2的传代比例，首次传代后每2天更换培养液。

备注：使用无菌离心管收集培养基，以便进行对比培养。如果对比效果不理想，建议直接使用尊龙凯时提供的完全培养基。

二、细胞收到后的处理

收货后，将细胞培养至良好状态，灌满完全培养液并密封培养瓶。接收细胞时，用75%酒精消毒瓶外表，以确保无菌。将细胞放入37℃、5% CO₂的培养箱内静置3-4小时，使细胞状态稳定后再进行下一步处理。在显微镜下观察细胞生长情况，并拍照保存不同倍数的照片（建议40x、100x、200x各一张），前三天的照片为售后依据。若未提供照片，默认细胞状态良好。注意，放入培养箱时，要将瓶盖稍微松开，传代时一瓶使用原有完全培养基，另一瓶使用自配的，以便进行对比。

三、细胞培养步骤

a、细胞传代

如果细胞汇合度未超过80%，将培养液收集至离心管中，保留5 ml完全培养基并放入37℃、5% CO₂培养；如果细胞密度超过80%，可进行传代，步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁的PBS清洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2 ml至培养瓶中，在37℃培养箱内消化1-2分钟，显微镜下观察细胞情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速返回操作台，轻敲几次后加入至少5 ml完全培养基以终止消化。
3. 轻轻吹打使细胞完全脱落后吸出悬液，转移至15 ml离心管中，在1000 RPM下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2 ml完全培养基重悬。
4. 按1:2比例将细胞悬液分瓶（两个T25瓶），补充至5-8 ml完全培养基，放入37℃、5% CO₂培养箱中培养。

b、细胞冻存

1. 细胞覆盖培养瓶80%面积时，弃去培养液，用PBS清洗细胞一次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1 ml，轻轻摇动观察细胞，待其变圆后加入5 ml完全培养液终止消化并轻轻吹打，转移悬液至15 ml离心管中，1000 RPM离心5分钟。
3. 弃上清，沉淀细胞后加入1 ml无血清冻存液（如尊龙凯时提供的货号：C7001），混匀后转移至冻存管中。
4. 冻存细胞直接放入-80℃冰箱，如需转入液氮罐，需在-80℃冰箱中存放24小时以上。

c、细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管（注意佩戴防护装备），迅速放入37℃水浴解冻，直至无结晶后用75%酒精消毒管外。
2. 将细胞移至含5 ml完全培养基的15 ml离心管中，1000 RPM离心5分钟。
3. 弃上清，重悬于5 ml完全培养基并接种至T25培养瓶，放于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。
4. 第二天更换为新鲜完全培养基并继续培养。

四、注意事项

某些细胞在运输过程中可能因贴壁不牢而脱落，这是正常现象。请将培养瓶中的培养液收集至离心管，1000 RPM离心5分钟以收集上清进行对比培养。沉淀后，加入胰酶1-2 ml，轻轻吹打进行重悬，消化1-2分钟后加入5 ml完全培养基以终止消化，再次离心并重悬。按1:2比例分瓶传代（两个T25），补充新的完全培养基至5-8 ml/瓶，最后放入37℃、5% CO₂细胞培养箱中培养。

五、售后条款

关于细胞出现问题的重发条款如下：

1. 细胞在运输过程中如遭遇问题（细胞丢失、瓶身破损、培养液漏液等），可申请重发。
2. 收到后48小时内如有污染问题，请提供真实实验结果，经核实后可重发。
3. 常温或干冰运输后细胞复苏24小时内存活率低于标准，需提供清晰细胞状态照片，符合条件可重发。
4. 如在运输过程中出现污染且不作开封检查，符合条件可重发。
5. 细胞活性问题需在7天内提供实验结果（如台盼蓝染色法），经核实可重发。
6. 收到当天及后两天请拍照，如未告知视为产品合格，4-7天内出现问题需要详细提供文件，否则不予重发。

尊龙凯时致力于为科研人员提供优质的细胞培养产品及服务，确保实验顺利进行。