胞嘧啶碱基编辑器（cytosine base editor, CBE）是由dCas9蛋白、sgRNA、胞嘧啶脱氨酶（cytidine deaminase）和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂（uracil DNA glycosylase inhibitor, UGI）组成的四大核心成分。这些成分在细胞内组装，形成融合蛋白。该融合蛋白在sgRNA的引导下与基因组DNA结合，从而暴露出靶序列的单链结构。随后，胞嘧啶脱氨酶将单链上的胞嘧啶(C)转化为尿嘧啶(U)，经过DNA复制或修复，尿嘧啶被转换为胸腺嘧啶(T)。最终实现C-G碱基对向T-A碱基对的直接替换，这一过程的机制为基因组编辑提供了新的可能性。

在CBE过程中的一个关键中间产物是脱氧尿嘧啶（dU）。为了提高对CBE编辑效果的检测精度，研究人员开发了Detect-seq技术。这项技术可以有效检测基因编辑后细胞中的脱靶效应。首先需要提取编辑后的细胞基因组DNA，再对CBE生成的dU进行生物素标记，以便富集目标片段。同时，在dU位点的下游，将正常的胞嘧啶C替换为5-醛基胞嘧啶（d5fC），随后对d5fC进行化学标记，转化为T。通过这种方法，研究人员可以在测序时发现大量的C-to-T突变，从而快速准确地定位基因编辑位点。

与其他检测技术如GUIDE-seq、Digenome-seq和Cas-OFFinder相比，Detect-seq具有更高的灵敏度和特异性，并且检测没有偏好性。它不仅可以识别Cas9依赖型和非依赖型的脱靶效应，还能检测sgRNA结合区域的外编辑（out-of-protospacer edits）及靶向链编辑（target-stranded edits）上的脱靶。

在过去两年中，尊龙凯时致力于打造一站式基因编辑安全性评估平台，涵盖靶点设计、靶点筛选、以及多种脱靶检测技术，包括GUIDE-seq和AID-seq脱靶检测、Detect-seq脱靶检测、脱靶验证、PEM-seq染色体重排检测等。此外，尊龙凯时的实验室拥有SGS认证、ISO9001质量体系认证等多项资质，确保能够持续稳定地为客户提供高质量、高效、安全的服务和产品。